Изучение культивируемых in vitro лекарственных растений Bidens pilosa L. / Матвеева Н.А. 2015
Препринт в сокращенном изложении
Растения рода Bidens (Asteraceae), распространены в основном в регионах с теплым климатом, встречаются в Америке, Африке, Европе, Азии. В традиционной и народной медицине известно однолетнее травянистое растение Bídens tripartita L., череда трехраздельная. Вместе с тем, у нас практически неизвестно растение тропического региона Bidens pilosa L. Выявлено, что в этих растениях синтезируется ряд биологически активных соединений. Растения проявляют противовоспалительную, противовирусную, противоопухолевую, противодиабетическую, противомикробную и др. активности.
Целью наших исследований было введение в стерильную культуру растений Bidens pilosa L. для получения материала для биотехнологических исследований и изучения антимикробной активности экстрактов культивируемых in vitro растений.
Материалы и методы исследования
Исходным материалом служили семена растений Bidens pilosa L., собранные в Эквадоре на территории базы «Ла Фаворита» Северного технического университета Эквадора. Семена поверхностно стерилизовали путем обработки 70% этанолом 30 сек, 25% раствором препарата «Белизна» (ЗБХ «Милам», Украина) 5–10 мин, промывали трижды по 10 мин стерильной дистиллированной водой и помещали на поверхность агаризованной среды Мурасиге и Скуга (Murashige, Skoog, 1962) с уменьшенным вдвое содержанием макросолей (1/2МС). Семена проращивали при температуре +24 °С. Размножали полученные из семян растения путем черенкования и укоренения на той же среде.
Для определения антимикробной активности дик-диффузным методом использовали водные, этанольные, ДМСО и ацетоновые экстракты культивируемых in vitro растений. На диски диаметром 6 мм наносили по 30 мкл экстракта, висушивали и тестировали, используя культуры бактерий Bacillus subtilis ATCC 6633, Escherichia coli B906, Staphylococcus aureus B918, Agrobacterium rhizogenes А4. В качестве контроля использовали диски с тетрациклином, ванкомицином, рифампицином, ампициллином, эритромицином, цефазолином.
Результаты и их обсуждение
Семена растений собирали в период дождей во влажном тропическом лесу умеренного высокогорья Эквадора (высота 1200 м над уровнем моря).
Водный экстракт растений обладал антимикробной активностью против бактерий Bacillus subtilis ATCC 6633, Escherichia coli B906, Staphylococcus aureus B918. Однако этот экстракт не угнетал рост фитопатогенных бактерий Agrobacterium rhizogenes А4. Спиртовый и ацетоновый экстракты ингибировали рост B. subtilis и S. aureus, хотя и в меньшей степени, чем водный. Следует отметить, что ингибирующее действие водного экстракта по отношению к S. аureus было больше, чем действие тетрациклина и ванкомицина. Водный экстракт растений также значительно больше ингибировал рост бактерий E. сoli (12 мм), чем эритромицин, ампициллин, ванкомицин и цефазолин (0, 0, 8, 0 мм).
Экстракты культивируемых нами in vitro растений B. pilosa имели противомикробную активность, сравнимую с активностью аналогичных экстрактов, приготовленных из in vivo выращенных растений. Таким образом, в условиях in vitro синтез биологически активных соединений, определяющих антимикробную активность растений, сохранялся, а антибактериальная активность была аналогичной активности экстрактов растений, собранных в природной среде.
Выводы
Поверхностная стерилизация семян B. pilosa с использованием 70% этанола и 25% раствора препарата «Белизна» позволила получить асептические растения, которые после черенкования укоренялись на безгормональной среде 1/2МС, быстро росли и обладали антимикробной активностью, аналогичной активности растений, собранных в природных условиях.
Источники
- Матвеева Н.А. Редагування Изучение культивируемых in vitro лекарственных растений Bidens pilosa L. // Agrobiodiversity for improving nutrition, health and life quality – Nitra: Slovak University of Agriculutre, 2015. – P. 470-473
- Доклад на конференции II МЕЖДУНАРОДНАЯ НАУЧНАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ "АГРОБИОРАЗНООБРАЗИЕ ДЛЯ УЛУЧШЕНИЯ ПИТАНИЯ,ЗДОРОВЬЯ И КАЧЕСТВА ЖИЗНИ"
