Публікація:Щербак НЛ и др (2006) Изучение влияния lox-сайтов Cre-lox системы рекомбинации на экспрессию беспромоторного bar гена в трансгенных растениях
(Нова сторінка: Щербак Н.Л., Белокурова В.Б., Гецко И.О., [[Комарницкий ИК|...) |
|||
| (Одна проміжна версія одного користувача не показана) | |||
| Рядок 1: | Рядок 1: | ||
| − | [[Щербак НЛ|Щербак Н.Л.]], [[Белокурова ВБ|Белокурова В.Б.]], | + | [[Щербак НЛ|Щербак Н.Л.]], [[Белокурова ВБ|Белокурова В.Б.]], Гецко И.О., [[Комарницький ІК|Комарницкий И.К.]], [[Кучук МВ|Кучук Н.В.]] (2006) Изучение влияния <I>lox-</I>сайтов Cre-<I>lox</I> системы рекомбинации на экспрессию беспромоторного <I>bar </I>гена в трансгенных растениях. // <i>[[Цитология и генетика]]</i>. <b>40</b> (1), 3-9 |
<p>Показано, что при размещении<I> lox-</I>сайта в генетических конструкциях в непосредственной близости от правой границы Т-ДНК (RB – <I>lox</I> – <I>bar –</I>) происходит стабильная экспрессия следующего за <I>lox-</I>сайтом беспромоторного <I>bar</I> гена. Генетические конструкции, которые были использованы в работе, содержали также ген неомицинфосфотрансферазы II (<I>npt II</I>) под контролем nos промотора. Трансформированные растения <I>Nicotiana tabacum</I> и <I>N. africana</I> были отобраны по способности расти на среде, содержащей канамицин, а затем протестированы на селективной среде, содержащей фосфинотрицин. У 80 % трансгенных растений, отобранных по устойчивости к канамицину, экспрессия <I>bar </I>гена происходила на таком же уровне, как и у растений, трансформированных конструкциями, в которых <I>bar </I>ген находится под сильным конститутивным промотором. При использовании конструкции без <I>lox-</I>сайта, в которой беспромоторный <I>bar</I> ген находится возле правой границы Т-ДНК (RB –<I> bar –</I>), либо конструкций, в которых <I>lox-</I>сайт и беспромоторный <I>bar</I> ген расположены в середине конструкции (– <I>lox</I> – <I>bar –</I>), частота РРТ-устойчивых растений составила не более 4,5 %. Анализ с помощью ПЦР не выявил возможных тандемных повторов или рекомбинации, в результате которых беспромоторный <I>bar</I> ген мог оказаться под контролем промотора, находящегося в плазмиде. При встраивании nos-терминатора в вектор между <I>lox-</I>сайтом и правым бордером частота РРТ-устойчивых трансгенных растений не изменилась.</P> | <p>Показано, что при размещении<I> lox-</I>сайта в генетических конструкциях в непосредственной близости от правой границы Т-ДНК (RB – <I>lox</I> – <I>bar –</I>) происходит стабильная экспрессия следующего за <I>lox-</I>сайтом беспромоторного <I>bar</I> гена. Генетические конструкции, которые были использованы в работе, содержали также ген неомицинфосфотрансферазы II (<I>npt II</I>) под контролем nos промотора. Трансформированные растения <I>Nicotiana tabacum</I> и <I>N. africana</I> были отобраны по способности расти на среде, содержащей канамицин, а затем протестированы на селективной среде, содержащей фосфинотрицин. У 80 % трансгенных растений, отобранных по устойчивости к канамицину, экспрессия <I>bar </I>гена происходила на таком же уровне, как и у растений, трансформированных конструкциями, в которых <I>bar </I>ген находится под сильным конститутивным промотором. При использовании конструкции без <I>lox-</I>сайта, в которой беспромоторный <I>bar</I> ген находится возле правой границы Т-ДНК (RB –<I> bar –</I>), либо конструкций, в которых <I>lox-</I>сайт и беспромоторный <I>bar</I> ген расположены в середине конструкции (– <I>lox</I> – <I>bar –</I>), частота РРТ-устойчивых растений составила не более 4,5 %. Анализ с помощью ПЦР не выявил возможных тандемных повторов или рекомбинации, в результате которых беспромоторный <I>bar</I> ген мог оказаться под контролем промотора, находящегося в плазмиде. При встраивании nos-терминатора в вектор между <I>lox-</I>сайтом и правым бордером частота РРТ-устойчивых трансгенных растений не изменилась.</P> | ||
| Рядок 6: | Рядок 6: | ||
[[Категорія:Публікації|2006]] | [[Категорія:Публікації|2006]] | ||
[[Категорія:Публікації 2006]] | [[Категорія:Публікації 2006]] | ||
| + | [[Категорія:Статті 2006|Щербак НЛ]] | ||
[[Категорія:Цитология и генетика|2006]] | [[Категорія:Цитология и генетика|2006]] | ||
[[Категорія:Щербак НЛ Публікації|2006]] | [[Категорія:Щербак НЛ Публікації|2006]] | ||
[[Категорія:Белокурова ВБ Публікації|2006]] | [[Категорія:Белокурова ВБ Публікації|2006]] | ||
| − | [[Категорія:Гецко | + | [[Категорія:Гецко ІО Публікації|2006]] |
| − | [[Категорія: | + | [[Категорія:Комарницький ІК Публікації|2006]] |
| − | [[Категорія:Кучук | + | [[Категорія:Кучук МВ Публікації|2006]] |
Версія за 13:18, 10 жовтня 2009
Щербак Н.Л., Белокурова В.Б., Гецко И.О., Комарницкий И.К., Кучук Н.В. (2006) Изучение влияния lox-сайтов Cre-lox системы рекомбинации на экспрессию беспромоторного bar гена в трансгенных растениях. // Цитология и генетика. 40 (1), 3-9
Показано, что при размещении lox-сайта в генетических конструкциях в непосредственной близости от правой границы Т-ДНК (RB – lox – bar –) происходит стабильная экспрессия следующего за lox-сайтом беспромоторного bar гена. Генетические конструкции, которые были использованы в работе, содержали также ген неомицинфосфотрансферазы II (npt II) под контролем nos промотора. Трансформированные растения Nicotiana tabacum и N. africana были отобраны по способности расти на среде, содержащей канамицин, а затем протестированы на селективной среде, содержащей фосфинотрицин. У 80 % трансгенных растений, отобранных по устойчивости к канамицину, экспрессия bar гена происходила на таком же уровне, как и у растений, трансформированных конструкциями, в которых bar ген находится под сильным конститутивным промотором. При использовании конструкции без lox-сайта, в которой беспромоторный bar ген находится возле правой границы Т-ДНК (RB – bar –), либо конструкций, в которых lox-сайт и беспромоторный bar ген расположены в середине конструкции (– lox – bar –), частота РРТ-устойчивых растений составила не более 4,5 %. Анализ с помощью ПЦР не выявил возможных тандемных повторов или рекомбинации, в результате которых беспромоторный bar ген мог оказаться под контролем промотора, находящегося в плазмиде. При встраивании nos-терминатора в вектор между lox-сайтом и правым бордером частота РРТ-устойчивых трансгенных растений не изменилась.
